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BIBLIOTECA DO INSTITUTO DE QUÍMICA
UNICAMP

 
DISSERTAÇÃO DE MESTRADO
 
Autora: Lima, Maria Lair Sabóia de Oliveira
Título: Bioprospecção e Investigação do Perfil Enzimático e Enantiosseletivo de Micro-Organismos de Rejeitos de Minas de Cobre (PA)
Ano: 2013
Orientadora: Profa. Dra. Anita Jocelyne Marsaioli
Departamento: Química Orgânica
Palavras-chave: Bioprospecção, Triagem de alto desempenho, Enantiosseletividade, Quick-E
Resumo: O uso de catalisadores biológicos é importante na academia e na indústria, pois une o ecologicamente correto com o ecologicamente viável. Assim, a busca por novas rotas reacionais viáveis e menos poluentes se enquadra no contexto da química verde, onde o ambiente e os rejeitos são levados em consideração. Com base nestes princípios o presente trabalho visa avaliar o perfil enzimático de micro-organismos provenientes de rejeitos de mineração da Mina do Sossego (Canaã dos Carajás – PA), pertencente à “VALE”. Após o isolamento e preservação, as cepas foram caracterizadas por espectrometria de massas, com a técnica MALDI-TOF, onde foram encontradas bactérias dos gêneros Pseudomonas sp., Bacilus sp., Acinetobacter sp., Delfitia sp. e Escherichia sp. As atividades enzimáticas foram avaliadas através de uma triagem rápida e eficiente (HTS, high throughput screening) utilizando sondas fluorogênicas não comerciais baseadas na umbeliferona. Dos 228 micro-organismos isolados, 156 tiveram suas atividades enzimáticas avaliadas das quais 70 apresentaram atividade para esterases, 80 para lipases, 11 para epóxi-hidrolases e 53 para mono-oxigenases. Ainda com base no princípio da triagem enzimática de alto desempenho, foram sintetizadas sondas fluorogênicas quirais e um composto competidor para implementação de uma metodologia conhecida como Quick-E. Esta metodologia visa uma avaliação rápida da enantiosseletividade de esterases em células íntegras através de medidas das velocidades iniciais das biorreações com as sondas fluorogênicas quirais avaliadas separadamente.
Abstract: Biocatalysts are important in academia and industry joining the ecological friendly to the ecological safe and efficient processes. Thus, the search for new synthetic routes and reactions producing less hazardous residues fits into the principles of green chemistry as environment and residues are taken into consideration. Based on these principles, present study aims at the enzymatic profiling of microorganisms (156 strains) from cooper mine (Sossego’s mine, Canaã dos Carajás- PA), belonging to VALE. After isolation (228 microorganisms) and preservation, the strains were characterized by mass spectrometry (MALDI-TOF, 62 strains), being characterized bacterias Pseudomonas sp., Bacilus sp., Acinetobacter sp., Delfitia sp. and Escherichia sp.. The enzymatic activities were evaluated by a high throughput screening using fluorogenic probes based on umbelliferone. Outstanding enzymatic activities of these 156 micro-organisms were: esterases (70), lipases (80), epoxy hydrolases (11) and monooxygenases (53). Additionally the implementation of a novel Quick-E methodology with chiral fluorogenic probes and a competitor will allow the rapid evaluation of esterases enantioselectivities in whole cells by measuring inicial rates of bioreactions in micro scale reactions.
Arquivo (Texto Completo): 000908442.pdf ( tamanho: 6,06MB )

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