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BIBLIOTECA DO INSTITUTO DE QUÍMICA
UNICAMP

 
TESE DE DOUTORADO
 
Autor: Masini, Jorge Cesar
Título: Aperfeiçoamentos na Metodologia de Titulações Potenciométricas de Polieletrólitos com Ênfase a Proteínas Nativas e Desnaturadas
Ano: 1990
Orientador: Prof. Dr. Oswaldo E. S. Godinho
Departamento: Química Analitica
Palavras-chave: -
Resumo: Um método linear baseado em rigorosos balanços de massa e carga para sistemas ácido-base tem sido aplicado a dados de titulações potenciométricas de proteínas para determinar e caracterizar grupos tituláveis presentes nestes materiais. Neste trabalho de tese estudou-se tal metodologia visando-se otimizá-Ia ou aperfeiçoá-Ia nos seguintes pontos: 1. Avaliou-se criticamente os efeitos quali e quantitativos nos resultados obtidos em função de se tratar os grupos tituláveis da proteína como uma mistura de ácidos fracos monopróticos, ignorando-se o termo de variação de energia livre eletrostática que acompanha a dissociação de grupos presentes em polieletrólitos. 2. Avaliou-se o método quando aplicado a proteínas desnaturadas em soluções de cloridrato de guanidina GuHCl, 6 M, condições nas quais todos os segmentos da cadeia são expostos ao solvente e em que os efeitos eletrostáticos sobre a dissociação dos grupos são minimizados. 3. Estudou-se a possibilidade de determinação do ponto isoelétrico, pI, das proteínas a partir dos resultados obtidos por titulação, bem como seu uso no auxílio da atribuição da natureza química dos grupos determinados. 4. Investigou-se a quantidade mínima de proteína que pode ser estudada pelo método.
Abstract: A linear method based on a rigorous charge and mass balance for acid-base equilibrium have been applied to potentiometric titration data for determination and characterization of titratable groups of protein molecules. In the present thesis the method was studied in the following points: 1. The titratable groups of polyeletrolytes or proteins are treated as a mixture of weak monoprotic acids, neglecting the free eletrostatic energy which accompanies the dissociation of these groups. In this work, the qualitative and quantitative consequences on the results caused by this treatment were critically studied. 2. The method was avaliated when applied to proteins denaturated in solutions of guanidine hydrochloride, GuHCl, 6.0 M. ln this media, all segments of polypeptide chain are exposed to the solvent and the eletrostatic effects on the dissociation are minimized. 3. The possibility of determination of isoelectric point from results of stoichiometry and pKa's obtained from titration was studied. The pI determined by this method can be useful in the attribution of chemical identity of titrated groups. 4. The minima amount of protein which can be used for application of the methodology was investigated.
Arquivo (Texto Completo): vtls000045495.pdf ( tamanho: 8,00MB )

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