Comissão
Estatuto
Histórico
Localização
Contato
BIQ
BIBLIOTECA DO INSTITUTO DE QUÍMICA
UNICAMP

 
TESE DE DOUTORADO
 
Autor: Alves, José do Patrocinio Hora
Título: Linearização da Curva de Titulação Potenciométrica de Proteínas. Aplicação à Lisozima, b-Lactoglobulina e Imunoglobulina Humana
Ano: 1982
Orientador: Prof. Dr. Osvaldo Espírito Santo Godinho
Departamento: Química Analítica
Palavras-chave: -
Resumo: Neste trabalho foram feitas titulações potenciométricas de proteínas, no estado nativo em força iônica 0,10 e 1,0 M e desnaturadas com uréia e cloridrato de guanidina. As soluções de proteínas, nativas ou desnaturadas, mais excesso de ácido forte foram tituladas com solução padrão de hidróxido de sódio. Os dados das titulações foram analisados pelo método da linearização da curva de titulação, que permitiu obter, ao mesmo tempo, o ponto de equivalência dos vários grupos tituláveis da proteína e suas respectivas constantes de dissociação. Os resultados obtidos para lisozima, b-lactoglobulina e imunoglobulina humana, mostraram que este método funciona muito bem na titulação de proteínas. Em todos os três casos foram caracterizados dois tipos diferentes de grupos carboxílicos e grupos imidazol e amino. Os grupos amino foram parcialmente titulados no estado nativo e totalmente no estado desnaturado. Uma observação importante é que somente em uréia, os resultados da estequiometria da lisozima foram concordantes com os números de grupos indicados pela sequência de aminoácidos. Esta mesma observação não pôde ser feita com as outras proteínas, devido a falta de uma sequência de aminoácidos bem estabelecida.
Abstract: Potentiometric titrations of native and denatured proteins have been performed. In the first case, the titrations heve been realized at ionic strengths 0.10 and 1.0 M and in the second case, the proteins have been denatured by urea or guanidine hydrochloride before to be titrated. The solutions of proteins plus strong acid were titrated with sodium hydroxide solution. The application of the method of the linearization of titration curves, to the data obtained, lead us to determine the equivalence point and the dissociation constants of the titratable groups of the proteins. The results obtained for lysozyme, b-lactoglobuline and human imunoglobuline were capable to show that the application of this method, to the titration of proteins, is advantageous. Amino, imidazole and two types of carboxylic groups have been characterized in the application of the method to the proteins studied in this work. Only part of the amino groups have been titrated in the case of native proteins, but they are completely determined when the proteins are denatured before the titration. An interesting fact to note is that the stoichiometry of lysozyme agrees with the results of the aminoacid sequence, only in the case of the denaturation with urea. It was not possible to checkehether there is or not this concordance in the case of other proteins, due to the fact that their aminoacid sequence are not available.
Arquivo (Texto Completo): vtls000043275.pdf ( tamanho: 7,29MB )

Instituto de Química / Caixa Postal n° 6154
Universidade Estadual de Campinas - UNICAMP
13083 - 970, Campinas, SP, Brasil
e-mail: biq@iqm.unicamp.br
2012-2014 BIQ