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BIBLIOTECA DO INSTITUTO DE QUÍMICA
UNICAMP

 
TESE DE DOUTORADO
 
Autora: Vila, Marta Maria Duarte Carvalho
Título: Determinação Enzimática de Salicilato com Sistema de Análise por Injeção em Fluxo
Ano: 2002
Orientador: Prof. Dr. Matthieu Tubino
Coorientador: Prof. Dr. Graciliano de Oliveira Neto
Departamento: Química Analítica
Palavras-chave: Salicilato, Análise por injeção em fluxo, Salicilato hidroxilase, Espectrofotometria
Resumo: A detecção rápida e segura dos níveis de salicilato em sangue é muito importante no acompanhamento clínico. O ácido salicílico é o maior metabólico do ácido acetilsalicílico no organismo, sendo o ácido acetilsalicílico um medicamento, freqüentemente, usado em diversos tratamentos médicos. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de sistemas de injeção em fluxo para a determinação quantitativa de salicilato em soro sanguíneo. Os métodos desenvolvidos se basearam na detecção de CO2 e de catecol gerados na reação da enzima salicilato hidroxilase com o substrato salicilato. A enzima foi imobilizada em pérolas de vidro de porosidade controlada e o reator preparado foi integrado nos sistemas de fluxo. O sistema desenvolvido com detecção do catecol foi baseado na reação entre o catecol e o 4-aminofenol com formação de uma espécie colorida, monitorada espectrofotometricamente a 565 nm. A faixa linear obtida foi de 0,5x10 a 5,0x10mol L com um limite de detecção de 0,2x10 mol L. O método também foi empregado na determinação de ácido acetilsalicílico em medicamentos. O outro método foi baseado na detecção do CO2. O CO2 gerado na reação permeia através de uma membrana de silicona, sendo recebido por um fluxo de uma solução de púrpura de bromocresol. A variação da absorbância da solução foi determinada espectrofotometricamente em 580 nm. Nas amostras de soro analisadas, na mesma faixa de concentração acima, obteve-se limite de detecção de 1,0x10 mol L. Os métodos apresentaram concordância como o método de referência somando-se as vantagens ligadas ao sistema FIA.
Abstract: The rapid and reliable detection of salicylate level in blood is very important in clinical monitoring. Salicylic acid is the main acetylsalicylic acid metabolic in the body. The acetylsalicylic acid is a medicine, commonly, used in various therapeutic chemicals. The aim of this work was the development of a flow injection system for spectrophotometric quantitative determination of salicylate in human serum. These methods are based on the generation of CO2 and catechol by the reaction of salicylate with the enzyme salicylate hydroxylase. This enzyme was chemically immobilized on controlled pore glass and the reactor prepared was integrated in the flow systems. The method developed using determination of catechol was based on the reaction between catechol and 4-aminophenol to give a colored product monitored spectrophotometically at 565 nm. The linear range was.. 0.5x10 a 5.0x10mol L and the limit of detection was 0.2x10 mol L. The method was used for determination of acid salicylic in medicines. The other method was based on the detection of CO2. The CO2 generated in the reaction permeates through a silicone membrane and is received by a stream of bromocresol purple. The variation of solution absorbance was followed spectrophotometically at 580 nm. The serum samples was analyzed in the same concentration. The detection limit was 1.0x10 mol L. These methods were concordant with the reference method and added the advantages in flow systems.
Arquivo (Texto Completo): vtls000255823.pdf ( tamanho: 4,08 MB )

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