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BIBLIOTECA DO INSTITUTO DE QUÍMICA
UNICAMP

 
DISSERTAÇÃO DE MESTRADO
 
Autora: Abe, Clara Megumi
Título: Estudo Espectrofotométrico em Hiperbilirrubinemia: Análise de Bilirrubina e Enzimas Relacionadas
Ano: 1984
Orientador: Prof. Dr. Nelson Eduardo Durán Caballero
Departamento: Química Orgânica
Palavras-chave: --
Resumo: Desenvolveu-se um método fluorimétrico rápido e simples para a determinação de bilirrubina total (BR-T) e bilirrubina ligada à albumina (BR-HSA) em soros. Nesse método utiliza-se cela com geometria de ângulo reto e as análises são realizadas em amostras de soro com alto nível de BR, mantendo-se sempre constante a concentração de HSA. Os valores de BR-HSA são lidos diretamente no fluorímetro com amostras de soro diluído. Os valores de BR-T são lidos após a adição de 0,3% do detergente óxido de dodecildimetilamina (DDAO). Os resultados das análises de amostras de soro de adultos (10 casos) e de amostras de soro de crianças (20 casos) foram comparados com o método diazo. O coeficiente de correlação entre os níveis de BR-T determinado pelo método fluorimétrico e pelo método diazo para adultos foi de 0,98 e para crianças 0,99. O coeficiente de correlação entre BR-HSA determinada fluorimétricamente e BR-T determinada pelo método diazo foi de 0,97 para adultos e 0,93 para crianças. O valor de (BR-T)-(BR-HSA) / (BR-T) calculado para crianças com e sem fototerapia, mostrou diferenças para ambos os casos. Comparando o nível de BR-T determinado fluorimétricamente em amostras de soro de adultos e crianças, observou-se uma diferença na força da ligação BR-HSA sendo que as amostras de adultos apresentaram maior afinidade. Nos estudos do efeito da irradiação da enzima microssomal do fígado de ratos, encontrou-se um aumento na atividade frente ao p-nitrofenol e uma inibição frente a BR. Na irradiação de BR-HSA observou-se um aumento na velocidade de conjugação com ácido glucurônico.
Abstract: A rapid and simple fluorimetric method has been developed for determinations of total bilirubin (BR-T) and bilirubin bound to albumin (BR-HSA) sera. Right angle geometry cells in this method were used and the analyses were performed in samples with high bilirubin levels and constant concentration of albumin. The BR-HSA values were determined directly on a fluorimeter in samples of diluted serum. The BR-T values were determined after addition of 0,3% dodecyldimethylamine oxide detergent (DDAO). The results of the analysis of adult serum samples (10 cases) and of serum samples from children (20cases) were compared with the diazo method. The correlation coefficient between the BR-T level determined by the fluorimetric method and that determined by the diazo method for adults was 0,98 and for children 0,99. The correlation coefficient between BR-HSA determined fluorimetrically and the BR-T determined by diazo method was 0,97 for adults and 0,93 for children. The value (BR-T)-(BR-HSA) / (BR-T) for children with or without phototherapy showed differences in both cases. Comparing the BR-T level determined fluorimetrically in samples from adults and children, a difference in the BR-HSA binding strength was observed. The adult sample has higher affinity. An increase of activity of rat liver microsomal enzyme using p-nitrophenol as substrate was found in photochemical studies. Nevertheless, an inhibition was observed using BR as substrate. In the irradiation of BR-HSA, an increase of glucoronic acid conjugation rate was observed.
Arquivo (Texto Completo): vtls000035434.pdf ( tamanho: 2,09MB )

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